Индиана Джоунс се впуска в търсене на чаровния си баща, професор Хенри Джоунс, който е изчезнал, докато издирва Светия Граал. Известният авантюрист и археолог придобива дневник, изпратен от баща му от Италия, в който се съдържат указания и карта без имена за намирането на свещената чиния, камък или бокал. След като разбира от колекционера Уолтър Донован, че мисията за издирване на предмета от Артурската литература е отишла в задънена улица след изчезването на бащата, Индиана Джоунс и музийният куратор Маркъс Броуди предприемат пътуване до Италия, за да го намерят.