Події картини оповідають про кровопролитну битву при Фермопілах в 480 році до н.е., коли триста відважних спартанців на чолі зі своїм царем Леонідом перегородили шлях багатотисячної армії персидського царя Ксеркса. Не дивлячись на чисельну перевагу персів, спартанці наполегливу тримали оборону, проявивши мужність і відвагу. Їх безстрашність і героїзм надихнули всю Грецію на об'єднання проти нездоланного ворога, переламавши тим самим хід Греко-перських воєн.